Bestemmelse af oxalsyreindhold i frugt og grøntsager ved hjælp af højtydende væskekromatografi (HPLC)
1. Eksperimentelt princip og metodedesign
Som en almindelig organisk syre i frugt og grøntsager påvirker oxalsyreindholdet direkte smagen og næringsværdien af fødevarer. Dette eksperiment anvender omvendt fase højtydende væskekromatografi (RP-HPLC). Under sure mobile faseforhold baselinesepareres oxalsyre fra interfererende stoffer ved hjælp af en C18 kromatografisk kolonne. En ultraviolet detektor indstillet til 210 nm anvendes til kvantitativ analyse, baseret på UV-absorptionsegenskaberne for carboxylgrupperne i oxalsyremolekyler.
2. Standardkurve og prøveforberedelse
En gradientfortyndingsmetode anvendes til at fremstille standardopløsninger: afvej nøjagtigt 25,0 mg oxalsyredihydrat og fortynd til 25 ml med ultrarent vand for at opnå en stamopløsning på 1 mg/ml. Denne fortyndes sekventielt i en række standardopløsninger ved 50, 100, 200, 400 og 800 µg/ml, hvor hver koncentration injiceres i triplikat.
Til prøveforberedelse anvendes mikrobølgeassisteret ekstraktion: vej 5,00 g frugt-/grøntsagshomogenat, tilsæt 10 ml 0,1 mol/L saltsyreopløsning, behandl ved 60 °C i mikrobølgeovn i 10 minutter, filtrer gennem et 0,45 µm membranfilter, og opsaml filtratet til testning.
3. Optimering af kromatografiske betingelser
Den mobile fase er et 0,01 mol/L kaliumdihydrogenfosfatbuffer (pH 2,5)-acetonitril (95:5) system med en flowhastighed på 0,8 ml/min og en kolonnetemperatur på 35 °C. Justering af acetonitrilforholdet viser, at når den organiske fase overstiger 10 %, forkortes retentionstiden for oxalsyre til mindre end 3 minutter, men der forekommer peak-tailing. Under de endelige optimerede betingelser er retentionstiden for oxalsyre 4,2 minutter, hvilket opnår fuldstændig separation fra tilstødende citronsyre og æblesyre (opløsning > 1,5).
4. Metodevalidering
Verifikation af lineært område viser en god lineær sammenhæng mellem topareal og koncentration i området 10-1000 µg/mL (R² = 0,9993). Detektionsgrænsen (LOD), bestemt ved signal-støj-forholdsmetoden, er 0,5 µg/mL. I repeterbarhedstest er RSD for seks replikatbestemmelser af den samme spinatprøve 1,8%. Spike-genfindingsforsøg på tre niveauer (80 %, 100 % og 120 %) giver gennemsnitlige genfindinger på henholdsvis 98,2 %, 102,4 % og 97,8 %, hvilket opfylder kravene til kvantitativ analyse.
5. Analyse af rigtige prøver
Seks kommercielt tilgængelige frugter og grøntsager blev testet: spinat (356 ± 12 mg/100 g), selleri (215 ± 9 mg/100 g), tomat (18 ± 2 mg/100 g), æble (6 ± 1 mg/100 g), banan (ikke påvist) og broccoli (89 ± 5 mg/100 g). En sammenligning med den nationale standardmetode (GB 5009.277-2016) viser, at den relative afvigelse mellem de to metoder er mindre end 5 %, hvilket bekræfter metodens pålidelighed. Især HPLC-metoden udviser højere følsomhed end traditionelle titreringsmetoder ved analyse af prøver med lavt indhold.
6. Hovednoter
Kontrollér pH-værdien nøje under prøveforbehandling. Hvis ekstraktets pH overstiger 3, vil calciumoxalatudfældning føre til lave testresultater. Den mobile fase bør fremstilles frisk dagligt for at undgå saltudfældning og blokering af kolonnen. Efter hver 20 injektioner skylles kolonnen med acetonitril-vand (30:70) i 30 minutter for at forhindre forringelse af kolonneeffektiviteten. For pigmentholdige prøver (f.eks. purpurkål) anbefales det at tilføje et fastfaseekstraktionsrensningstrin før injektion.
7. Anvendelses- og udvidelsesvejledning
Denne metode kan udvides til at påvise oxalsyre i biologiske prøver såsom urin og blod. Ved at justere den mobile fases sammensætning (f.eks. ved at tilsætte tetrabutylammoniumhydroxid) kan oxalsyre og dens metabolitter bestemmes samtidigt. Kombineret med en massespektrometridetektor kan der etableres en mere præcis spordetektionsmetode. I fødevareindustrien kan denne metode yde vigtig datastøtte til udvælgelse af varianter med lavt oxalsyreindhold og optimering af tilberedningsprocesser.
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. – Oxalsyre
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. er en pålidelig leverandør og eksportør af oxalsyre af høj kvalitet (industriel kvalitet, 99,6 % min.) fra Shandong, Kina. Vores oxalsyre er et hvidt krystallinsk fast stof, også kendt som ethandisyre, med molekylformlen C₂H₂O₄. Den har høj renhed, lave urenheder og stabil kvalitet på tværs af batcher og opfylder kravene inden for tekstil-, læder-, metallurgi-, sjældne jordartsmetaller-, kemisk rengørings- og byggeindustrien.
Vi leverer både vandfri og dihydrat oxalsyre i sække på 25 kg, 50 kg og 1000 kg store sække. Med strenge kvalitetskontrolprocedurer, komplette testrapporter og fleksible leveringsplaner sikrer vi stabil levering og ensartet ydeevne til globale købere. Vores produkter er blevet eksporteret bredt til Sydøstasien, Europa, Afrika og Amerika, hvilket har vundet anerkendelse for pålidelig kvalitet og konkurrencedygtige priser.
Vælg Zibo Anhao Chemical for pålidelig levering af oxalsyre og professionel one-stop-service af kemikalier.
Vælg Zibo Anhao Chemical for oxalsyre med høj renhed, der leverer stabil ydeevne og værdi for din virksomhed. Kontakt os for bulkbestillinger eller tekniske specifikationer: info@anhaochemical.com
